緒言

アロマ（aroma）とはギリシャ語でスパイス（香辛料）や香りを意味する言葉であり，アロマオイル（aroma oil）とは精油（エッセンシャルオイル，essential oil）をアルコールやキャリアオイルなどで希釈したオイルのことである．また，精油は同じ植物から採れる植物油とは違い，揮発性が高く，非水溶性である．植物の花，葉，種子，幹，果皮，樹皮などいろいろな部分から抽出された100%天然の精油を疾病の治療や予防に用いる植物療法の１種が，アロマセラピー（aromatherapy）である（川端，1999；川端，吉井，田水，2000）．現在，アロマセラピーは，民間療法や補完代替医療として利用されている（川端，吉井，田水，2000；米田，下山，小原，樋口，角濱，藤井，2002；山本，松尾，濱田，2005）．使用方法として，原液のまま香り成分を空中に芳香させたり，吸入したり，植物油やアルコールで希釈し皮膚に塗布したり，マッサージの際にも精油が利用されているときも多い（川端，吉井，田水，2000；岩本，有田，小田村ほか，2002；鈴木，大久保，2008）．

フランス人科学者ルネ・モーリス・ガットフォセは実験中に誤ってやけどをし，あまりの熱さに，とっさに近くにあったラベンダーの精油の中にやけどした手を浸した．その後，そのやけどの傷は化膿することもなくきれいに治ったため，ガットフォセは

ラベンダーをはじめとした精油を研究し始めたと言われている（ガットフォセ，2006）．このエピソードにあるように，精油のなかには抗菌効果・抗ウイルス効果などがあるものが存在するとも言われている（ガットフォセ，2006）．

この精油の抗菌効果については過去１世紀以上にわたって調べられてきている（プライス，プライス，2004）．チャンバーランドによるシナモン油などに関する1887年の実験やコッホによる炭疽菌に対する1881年の実験が最初ではないかと言われている（プライス，プライス，2004）．それ以来，天然精油の抗

菌作用が調べられはじめてきたが，精油の抗菌効果に関する研究は1980年代までは決して多くない．

1990年代からはいくつか見られるようになったが，それぞれの研究は，研究目的が異なっていたり，異なる実験手法を使ったりしているものも多かった（リードル，1997；Carson, Hammer, Riley，2006；山本，長沢，太田，小林，2006）．そのため，確立さ

れた統一的な実験手法もないため，それら研究の直接的な比較が難しい状況のまま抗菌効果があると一般的に言われているのが現状である（Carson,Hammer, Riley，2006）．

そこで，このような現状を改善すべく，我々は精油には本当に抗菌効果があるのか，もしあるのならば，どの程度の抗菌効果なのかということを確認することにした．本研究はその第一段階として，精油の抗菌効果について細菌学的手法を用いて解析したので，報告したい．

方法

１．使用した精油やキャリアオイル

本研究においては純度100％の精油を用いて研究を進めた．実験に使う精油は，皮膚など人体に常在している細菌に対し抗菌効果があると一般的に言われており，知名度も高い上，比較的安価で，一般消費者でも手に入りやすいものとして以下の５種類を選んだ．

①フトモモ科メラルーカ属（Melaleuca）の常緑植物ティートリーMelaleuca alternifoliaより得られた精油ティートリー（ハ－ベストシーズン社），

②シソ科の背丈の低い常緑樹の１属であるラベンダー

属Lavandulaより得られた精油ラベンダー（ハーベストシーズン社），

③地中海沿岸地方原産で，シソ科に属する常緑性低木ローズマリー Rosmarinus　officinalisより得られた精油ローズマリー（パシフィックプロダクツ社），

④レモンCitrus limonum（パシフィックプロダクツ社）を使用した．

また，精油の効果の負の対照実験として，

キャリアオイルであるホホバオイルSimmondsia chinensis（Neumond, Simmondsia chinensis）を使用した．

２．対象細菌

対象細菌としてはヒトに常在し，健常者に対し病原性が低く，一般に知られている以下の３種類を選んだ．今後の口腔ケアやスキンケア技術の開発を念頭に置き，

「大腸菌（Escherichia coli, JM109，シグマ－アルドリッチ社）」，

「表皮ブドウ球菌Staphylococcus　epidermidis」，

「黄色ブドウ球菌Staphylococcus aureus」

の３種とした．ただし，表皮ブドウ球菌および黄色ブドウ球菌に関しては，健常者の表皮より卵黄加マンニット食塩寒天培地という専用寒天培地（アテクト社）を利用し単離した細菌を研究室で継代保存し，使用した．細菌の採取に際し，実験の趣旨および内容を口頭および文書で説明し，同意を得られた健常

者から採取した．

また，それぞれの細菌に対し，大腸菌には標準寒天培地（アテクト社）を，表皮ブドウ球菌および黄色ブドウ球菌には両ブドウ球菌専用の卵黄加マンニット食塩寒天培地という専用寒天培地（アテクト社）を使用した．

３．実験方法

抗菌効果の検討方法としては，細菌学でよく用いられている「阻止円」を形成させる方法でおこなっ各種細菌を専用寒天培地上に一面にまいた後，その上に精油20μl ずつ染みこませた円形（直径８mm）のろ紙をのせることでおこなった（図１）．この際，阻止円形成とその大きさの比較対照実験としてカナマイシン（KM）とアンピシリン（ABPC）の

染み込んだろ紙を使用した（図１，図２）．阻止円の形成は，細菌を一面にまいた後，精油を染み込ませたろ紙を乗せた寒天培地を37℃で18時間培養することでおこなった．抗菌効果の測定としては，阻止円の直径からろ紙の大きさを引いたものを算出および比較した（図２）．対象細菌と対象精油の組み合わせごとに３回ずつの実験をおこなった．実験の都合上，３回の実験を同一日時でできなかった場合もあった．

その場合でも，細菌の培養などは液体培地の場合も寒天培地の場合もすべて恒温器内で培養しているため，実験条件はすべて同じであると考えられる．また，本実験では，すべて恒温器を利用しているため，

室内温度（20℃）や室内湿度等の影響はないと考えられる．

図２：カナマイシン(KM)の大腸菌に対する阻止円

結果

１．各種精油における抗菌効果の検討（大腸菌の場合）

精油には多くの種類が存在し，それぞれにおいて効果が異なると考えられる．そこで我々は大腸菌を用いて各種精油における抗菌効果の検討をおこなった（表１，図３，図４，図５）．その結果，ティートリーのみが大腸菌に対して抗菌効果を示すことが明らかとなった．

２．各種精油における抗菌効果の検討（表皮ブドウ球菌の場合）

精油の細菌種に対する抗菌効果の違いを検討する必要性から，次に表皮ブドウ球菌について検討をおこなった（表２）．その結果，ティートリーは表皮ブドウ球菌に対しても抗菌効果があることがわかった

（表２，図６）．さらに，表皮ブドウ球菌に対してはラベンダーも抗菌効果をもつことが明らかとなった（表２，図７）．表皮ブドウ球菌の場合，ティートリーもラベンダーも同じ大きさの阻止円を形成したことから，ティートリーとラベンダーは表皮ブドウ球菌に対して同程度の抗菌効果を示すことがわかった．

３．各種精油における抗菌効果の検討（黄色ブドウ球菌の場合）

次にメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（MRSA）とも関連する黄色ブドウ球菌についても①や②の場合と同様に精油の抗菌効果の検討をおこなった（表３）．

黄色ブドウ球菌に対する抗菌効果は，表皮ブドウ球菌の場合と比べてかなり弱いながらも，ティートリーとラベンダーの２種類にみられることがわかった

（表３，図８矢印，図９矢印）．今回の黄色ブドウ球菌に対しては，抗生物質の阻止円が，大腸菌などの実験の際の抗生物質の阻止円と比べて小さかった．

精油の阻止円の大きさは小さかったが，抗生物質の阻止円の大きさと比較してティートリーとラベンダーはともに同程度の抗菌効果を示すという結果が得えらた

2020.09